AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIFÚNGICA E ALTERAÇÕES NA MEMBRANA CELULAR INDUZIDAS POR MILTEFOSINA EM SCEDOSPORIUM AURANTIACUM

Yuri de Castro Almeida; Rodrigo Rollin Pinheiro; Victor Pereira Rochetti; Luana Pereira Borba-Santos; Sonia Rozental; Eliana Barreto Bergter

Título do Trabalho

Autores

Yuri de Castro Almeida
Rodrigo Rollin Pinheiro
Victor Pereira Rochetti
Luana Pereira Borba-Santos
Sonia Rozental
Eliana Barreto Bergter

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Microbiologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/313794-avaliacao-da-atividade-antifungica-e-alteracoes-na-membrana-celular-induzidas-por-miltefosina-em-scedosporium-aur

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Scedosporium, reposicionamento de fármacos, membrana celular, terapia antifúngica

Resumo

Introdução: O gênero Scedosporium é formado por fungos filamentosos oportunistas responsáveis por uma série de infecções, sobretudo em pacientes imunocomprometidos, além de estarem frequentemente associados à colonização de pulmões de pacientes com fibrose cística (CORTEZ et al, 2008). O gênero, S. aurantiacum se destaca por apresentar resistência aos principais antifúngicos utilizados clinicamente, dificultando o tratamento das infecções (LACKNER et al, 2013). Um método que pode acelerar a identificação de novas abordagens terapêuticas seguras e eficazes é chamado de "drug repurposing". Um exemplo promissor é o da Miltefosina, uma alquilfosfocolina originalmente desenvolvida como agente antineoplásico, atualmente utilizada no tratamento oral da leishmaniose (DORLO et al, 2012). Miltefosina possui uma promissora atividade antifúngica contra diversos patógenos de relevância clínica, contudo, seu mecanismo de ação é pouco conhecido. Objetivo: Avaliar a suscetibilidade de S. aurantiacum à Miltefosina e investigar os efeitos na célula fúngica, em especial sobre a membrana celular. Metodologia: A suscetibilidade à Miltefosina foi determinada por microdiluição seriada, baseada na metodologia pelo CLSI; a suscetibilidade na presença de agentes estressores foi avaliada utilizando SDS e Calcofluor White. O espectrofotômetro NanoDrop 2000 foi utilizado para quantificar a presença de DNA e proteínas no sobrenadante de cultivo. Mudanças no padrão de acumulação de esteróis nos lipid-rafts foram analisadas através da fluorescência com Filipina. A suscetibilidade do fungo à Miltefosina na presença de glucosilceramida exógena foi analisada baseando-se nas técnicas do CLSI. Para mensurar a produção de Espécies Reativas de Oxigênio (EROs) e determinar o potencial de membrana mitocondrial, foram utilizados os marcadores fluorescentes DCFH-DA e JC-1, respectivamente. Resultados: S. aurantiacum foi suscetível à Miltefosina, com MIC90 de 4 µg/ml. Foram observadas alterações na fisiologia da membrana e da parede celular, tornando o fungo mais suscetível aos agentes estressores na presença da Miltefosina, além de alterações na permeabilidade de membrana, resultando na liberação de DNA e proteínas para o meio extracelular, possivelmente ocasionada pela alteração na integridade da membrana celular. Resultados da fluorescência com Filipina indicaram alterações nos lipid-rafts e a suscetibilidade do fungo à Miltefosina foi diminuída na presença de glucosilceramida exógena, sugerindo que os esfingolipídeos podem ser um dos alvos da Miltefosina. Outros mecanismos de ação foram identificados, como o aumento na produção de EROs e disfunção mitocondrial, evidenciada pela diminuição do potencial de membrana. Conclusão: Os resultados auxiliam a elucidar o mecanismo de ação antifúngico da Miltefosina, sugerindo como alvo principal a membrana celular, podendo futuramente ser utilizada como uma alternativa terapêutica para o tratamento de infecções fúngicas. Referências Bibliográficas Cortez, Karoll J et al. “Infections caused by Scedosporium spp.” Clinical microbiology reviews vol. 21,1 (2008): 157-97. doi:10.1128/CMR.00039-07. Dorlo, C et al. “Miltefosine: a review of its pharmacology and therapeutic efficacy in the treatment of leishmaniasis” Journal of Antimicrobial Chemotherapy, vol 67, 2576–2597 (2012) doi:10.1093/jac/dks275. Lackner, M., Guarro, J. “Pathogenesis of Scedosporium” Current Fungal Infections Reports 7, 326–333 (2013). doi:10.1007/s12281-013-0157-7.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

ALMEIDA, Yuri de Castro et al.. AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIFÚNGICA E ALTERAÇÕES NA MEMBRANA CELULAR INDUZIDAS POR MILTEFOSINA EM SCEDOSPORIUM AURANTIACUM.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/313794-AVALIACAO-DA-ATIVIDADE-ANTIFUNGICA-E-ALTERACOES-NA-MEMBRANA-CELULAR-INDUZIDAS-POR-MILTEFOSINA-EM-SCEDOSPORIUM-AUR. Acesso em: 25/04/2025