PURIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE VESÍCULAS EXTRACELULARES DO VENENO DE BOTHROPS JARARACA

Larissa Gonçalves Machado; Ketlenn Camila Miranda de Barros; RUSSOLINA BENEDETA ZINGALI

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Trabalho

Título do Trabalho

PURIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE VESÍCULAS EXTRACELULARES DO VENENO DE BOTHROPS JARARACA

Autores

Larissa Gonçalves Machado
Ketlenn Camila Miranda de Barros
RUSSOLINA BENEDETA ZINGALI

Modalidade

Resumo apresentação oral curta

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Bioquímica

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/315050-purificacao-e-caracterizacao-de-vesiculas-extracelulares-do-veneno-de-bothrops-jararaca

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Veneno, Bothrops jararaca, vesículas extracelulares

Resumo

Os venenos de serpentes são constituídos principalmente por proteínas secretadas pela glândula de veneno de maneira convencional. Algumas evidências recentes demonstraram a presença de proteínas minoritárias e outras moléculas biológicas secretadas em vesículas extracelulares (VEs) (Carneiro et al., 2007; Ogawa et al., 2008). As VEs desempenham papel fundamental na comunicação celular – em condições fisiológicas e patológicas- alterando várias funções biológicas da célula-alvo (Van Niel et al., 2018). Algumas questões acerca das vesículas ainda não foram respondidas, tais como a origem e destino de diferentes populações secretadas e a relevância biológica dessas vesículas em diferentes contextos, como a produção de veneno e o envenenamento clínico. Para tentar compreender um possível papel das VEs de veneno na comunicação celular entre organismos distintos (serpentes-mamíferos), esse projeto tem como objetivo isolar e estudar as atividades biológicas de VEs presentes no veneno da serpente Bothrops jararaca. Amostras de veneno fresco foram fracionados por centrifugação diferencial (8.000xg, 20.000xg e 100.000xg) resultando na obtenção de duas populações de VEs: uma população obtida a 20.000xg contendo VEs grandes e heterogêneas (P20K) e outra população sedimentada a 100.000xg enriquecida em vesículas menores e homogêneas (P100K). A análise por SDS-PAGE demonstrou que as populações de vesículas isoladas possuem um perfil proteico bastante distinto do veneno bruto. Resultados anteriores por microscopia eletrônica mostraram estrutura conservada e típica de microvesículas e exossomos nas frações P20K e P100K. Por microscopia de fluorescência demostrou-se a interação das VEs com células de mamíferos. A análise proteômica tem revelado marcadores específicos de VEs e abre hipóteses acerca do envolvimento dessas vesículas na produção e processamento do veneno na glândula. Por outro lado, consequências clínicas crônicas do envenenamento como a reabertura ou persistência de feridas após meses ou anos depois do acidente ainda não são compreendidas, mesmo após soroterapia. Considerando a biologia das VEs, as mesmas poderiam estar envolvidas nos efeitos imediatos, mas sobretudo nos efeitos tardios do envenenamento. Nessa ramificação do projeto de vesículas de veneno, os objetivos e perspectivas futuras são investigar se as populações de VEs, que são minoritárias em relação ao veneno bruto, podem ser reconhecidas e neutralizadas pelo soro antiofídico usado no tratamento. Com base nos dados obtidos até o momento e nos dados da literatura espera-se que as proteínas mais abundantes da superfície das vesículas sejam reconhecidas pelos anticorpos do soro, e uma vez bloqueadas deixem de fazer contato específico com receptores celulares, e com isso ocorra a diminuição da internalização das VEs em suas células-alvo. Existe ainda a possibilidade das proteínas de superfície e/ou proteínas carreadas no interior das VEs não serem neutralizadas com eficiência ou a internalização das mesmas não depender do contato específico de moléculas de superfície, trazendo a necessidade de novas estratégias de tratamento. CARNEIRO, Sylvia Mendes et al. Microvesicles in the venom of Crotalus durissus terrificus (Serpentes, Viperidae). Toxicon, 2007, v. 49, n. 1, p. 106-110. OGAWA, Yuko et al. Exosome-like vesicles in Gloydius blomhoffii blomhoffii venom. Toxicon, 2008, v. 51, n. 6, p. 984-993. VAN NIEL, G; D’ANGELO, G; RAPOSO, G. Shedding light on the cell biology of extracellular vesicles. Nature Reviews Molecular Cell Biology, 2018, v.19, n.4, p.213.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

MACHADO, Larissa Gonçalves; BARROS, Ketlenn Camila Miranda de; ZINGALI, RUSSOLINA BENEDETA. PURIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE VESÍCULAS EXTRACELULARES DO VENENO DE BOTHROPS JARARACA.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/315050-PURIFICACAO-E-CARACTERIZACAO-DE-VESICULAS-EXTRACELULARES-DO-VENENO-DE-BOTHROPS-JARARACA. Acesso em: 30/04/2025